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影响ELISA试剂盒曲线的因素

发布时间:2019-08-06 16:06 |  点击次数:

标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。我公司技术人员在处理售后的问题中,有不少科研朋友咨询曲线的问题。下面小编将影响ELISA试剂盒曲线问题的原因做了总结:
一 OD值不正常的可能原因是:

1、试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃;

2、温度控制不好,控制正确温度;

3、孵育时间不准确,控制孵育时间;

4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干;

5、阳光直射,对着风直接吹,避风避;

6、酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm;

7、抗体的稀释错误,正确的稀释抗体;

8、水质问题,用娃哈哈矿泉水代替。

二 白板的可能原因是:

1、洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液;

2、少加液体(错加液体),正确的步骤加液体。

三 无梯度可能原因是:

1、标准品也污染,换标准品点板;

2、OD值不正常,控制温度时间在做一次;

3、人为点板,不要点板。

四 线性不好可能原因是:OD值不正常,控制温度时间在做一次。